Natriumcitratpuffer wird häufig zur RNA-Isolierung verwendet, da er die Basenhydrolyse der RNA-Stränge minimiert und für die mRNA-Reinigung während des Vorgangs von unschätzbarem Wert ist genomisch Forschung und zum Studium der Transkription. Puffer auf Citratbasis unterstützen auch den Nachweis von Antigenen in fixierten Gewebepräparaten, da sie die zwischen den Antigenen und den Fixierungsmedien gebildeten Vernetzungen aufbrechen.
Mit den folgenden einfachen Schritten kann in weniger als 10 Minuten ein Natriumcitratpuffer mit einem pH-Wert von 6 (sauer) hergestellt werden.
Materialien für den Natriumcitratpuffer
Für die Herstellung des Natriumcitratpuffers sind nur wenige Materialien erforderlich. Mit Zitronensäure benötigt man nur 1 M Natriumhydroxid, destilliertes Wasser und eine kalibrierte pH-Sonde. Natriumcitrat ist optional.
Zur Herstellung des Puffers sind außerdem ein 1-Liter-Messzylinder, ein 1-Liter-Messkolben und drei 1-Liter-Medienflaschen erforderlich. Schließlich benötigen Sie einen Magnetrührstab und einen Magnetrührer. Alle diese Materialien können in der Schule gefunden werden,
Laboratorien vor Ort oder online oder in Fachgeschäften gekauft werden.Zwei Optionen zum Erstellen des Puffers
Abhängig von den Materialien, die Ihnen zugänglich sind, gibt es zwei Methoden, um Natriumcitratpuffer herzustellen.
- Wenn Sie sowohl Zitronensäure als auch die konjugierte Base haben, erstellen Sie jeweils eine Stammlösung, indem Sie 21 Gramm mischen Zitronensäure in 1 Liter destilliertem Wasser und 29,4 g Natriumcitrat in 1 Liter destilliertem Wasser Wasser.
- Wenn Sie nur Zitronensäure zur Hand haben, mischen Sie 2,1 Gramm in knapp 1 Liter destilliertem Wasser.
Mischen von Zitronensäure- und Natriumcitratlösungen
Mischen Sie 82 Milliliter der Zitronensäurelösung mit 18 Millilitern der Natriumcitratlösung. Fügen Sie dazu genügend destilliertes Wasser hinzu, um das Volumen der Mischung auf etwas unter 1 Liter zu bringen.
PH einstellen
Verwenden Sie 1 M Natriumhydroxid, während Sie die Lösung vorsichtig mit einem Magnetrührer umrühren, um den pH-Wert der Mischung auf 6,0 einzustellen. Fügen Sie dann mit einem Messkolben mehr destilliertes Wasser hinzu, um das endgültige Gesamtvolumen der Lösung auf genau 1 zu bringen Liter.